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            醫療器械檢測項目 Test items
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            圓二色譜測試機構 圓二色譜測試方法

            作者:微譜      服務熱線:400-700-8005

            圓二色譜測試條件是怎樣的,圓二色譜測試方法有哪些。微譜擁有各種大型精密儀器,借助準確測試方法和專業技術工程師,為各類企業提供專業的分析測試服務。于是帶著這些疑問去微譜檢測官方平臺尋求幫助。我覺得我還是不了解,因為這個東西我以前沒有了解過,所以我又去找相關的線下機構詢問了一下。經過長時間的摸索和資料的收集我終于理解了一點點。

              圓二色譜概念

              圓二色光譜(簡稱CD)是應用廣泛的測定蛋白質二級結構的方法,是研究稀溶液中蛋白質構象的一種快速、簡單、較準確的方法。它可以在溶液狀態下測定,較接近其生理狀態。而且測定方法快速簡便,對構象變化靈敏,所以它是目前研究蛋白質二級結構的主要手段之一,并已廣泛應用于蛋白質的構象研究中。

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              圓二色譜測試條件

              1、樣品必須保持一定的純度不含光吸收的雜質,溶劑必須在測定波長沒有吸收干擾;樣品能完全溶解在溶劑中, 形成均一透明的溶液。

              2、氮氣流量的控制

              3、緩沖液、溶劑要求與池子選擇:緩沖液和溶劑在配制溶液前要做單獨的檢查,看是否在測定波長范圍內有吸收干擾, 看是否形成沉淀和膠狀;在蛋白質測量中,經常選擇透明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。

              4、樣品濃度與池子選擇

              樣品不同,測定的圓二色光譜范圍不同,對池子大小(光徑)的選擇和濃度的要求也不一樣。蛋白質CD光譜測量一般在相對較稀的溶液中進行。

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              圓二色譜測試方法

              1、選為1 nm。對于高分辨率測量,要用較窄的狹縫寬度,此時光電倍增管的電壓較高,譜的信噪比差。雖然對于正常測量譜帶寬度是1~2 nm,但是在下列情況下要犧牲分辨率而需要較寬的狹縫寬度。當樣品的吸光度很高但CD信號很弱時,一方面要盡量保證測定CD峰所需要的足夠濃度,另一方面要設置較寬的狹縫。不過此時要特別小心,因為樣品在吸光度過高(A>2)的情況下可能存在熒光或雜散光引起的某些假象。另外,在固體CD光譜測試時也需要較大的狹縫寬度(一般要求 > 2 nm)。

              2、橢圓率和摩爾橢圓率都依賴于測量條件。因此,溫度、波長和樣品濃度總是應該特別注明的。

              3、當用壓片法或石蠟油研磨法進行固體粉末樣品測試時,要盡可能地研磨獲得細小均勻的樣品顆粒。采用石蠟油糊方法時,必須注意某些憎水有機化合物可能溶于石蠟油中,這時所得CD光譜在某種意義上應視為溶液CD光譜。采用壓片法測試固體CD時,在保證手性樣品的定性濃度達到CD光譜儀檢測要求的同時,片越薄越透明越好(但切忌破損)。在某些情況下,壓片法不適用于手性抗衡陰離子存在下的固體誘導CD光譜的測定。

              圓二色譜測試主要是對蛋白質進行檢測,影響圓二色譜測試的結果因素非常多,我們在進行圓二色譜測試的時候一定要尋找合適的樣品,要不然會導致檢測的結果無效。圓二色譜測試對于溫度、樣品濃度都有固定的要求,所以我在這些方面要格外的注意。



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